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人恶性黑色素瘤细胞A375在尊龙凯时的研究中应用

发布时间:2025-07-26   信息来源:尊龙凯时官方编辑

尊龙凯时在生物医学领域的培养条件如下:培养气相采用95%的空气和5%的二氧化碳,培养温度设定为37℃。我们使用的人黑色素瘤细胞株A375,来源于一名54岁女性黑色素瘤患者的淋巴结转移灶。这种细胞株在体外培养时具有上皮样形态,并表现出贴壁生长的特性。A375细胞广泛用于黑色素瘤的基础研究,包括探讨肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移机制,以及抗黑色素瘤药物的筛选和研发等方面。

人恶性黑色素瘤细胞A375在尊龙凯时的研究中应用

在细胞传代方面,我们建议第一次传代比例为1:2,并在每次传代后2天更换培养液。为确保细胞健康,建议同时购买相关的培养商品,以便进行有效的细胞培养。

收到细胞后,请勿立即开瓶盖。首先,要检查培养瓶上标注的细胞名称与订购信息是否一致,并确认培养瓶无损坏或泄漏现象。如果观察到细胞状态良好,可以使用显微镜进行细胞生长情况的拍照保存,尤其是在40x、100x、200x倍的放大下拍摄各一张,前三天的照片将作为重要的售后依据。如无照片,则默认细胞状态良好。

对于贴壁细胞的传代步骤,首先要弃去培养上清液,用不含钙、镁离子的PBS液洗涤细胞1-2次。然后添加约1-2ml的0.25%胰蛋白酶消化液至培养瓶中,放入37℃培养箱中消化1-2分钟,观察细胞消化情况。细胞大部分变圆并脱落后,添加5ml以上完全培养基以终止消化。

其次,轻轻吹打细胞使其完全脱落后,将悬液转移至15ml离心管中,以1000RPM离心5分钟,弃去上清液后补加入1-2ml的完全培养基进行重悬。最后,将细胞悬液按照1:2的比例进行分瓶传代,并加入新的完全培养基至每瓶5-8ml,然后放入37℃和5%CO2的细胞培养箱中继续培养。

对于悬浮细胞的传代,建议采用半换液法或离心换液法。半换液法是先在培养箱中静置1小时,然后轻轻吸去3ml的培养基并补充3ml新的完全培养基。若需分瓶,可以将细胞悬液收集至离心管中,离心后重悬并按1:2的比例分到新的培养瓶中。

细胞的冻存和复苏也是我们流程中的重要一步。当细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,应弃去培养液,PBS清洗,添加0.25%胰蛋白酶进行消化。消化完成后,加入无血清冻存液,混匀并装入冻存管,直接存放于-80℃冰箱中。

细胞的复苏需仔细操作,从液氮中取出冻存管后快速放入37℃水浴中解冻,随即转移至含5ml完全培养基的离心管中。经过离心后,弃去上清,重悬并接种至T25培养瓶,放入37℃、5%CO2的细胞培养箱中待细胞恢复生长。

需要注意的是,运输过程中细胞有可能脱落,这是正常现象。如情况严重,建议按上述步骤收集培养液以去除死细胞。所有这些步骤都围绕着优化细胞培养和确保细胞的活力来展开,与尊龙凯时品牌的理念一脉相承,旨在为客户提供优质的生物医学解决方案。